产品货号：
QN0950
中文名称：
通用RT-PCR试剂盒
英文名称：
Universal RT-PCR Kit
产品规格：
50T|100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品组成：
保存：-20℃，避免反复冻融，有效期1年。
注意事项：
使用方法：
相关搜索：通用RT-PCR试剂盒，Universal RT-PCR Kit
本试剂盒适用于各种RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在25μL反转录体系和50μL PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。
本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
产品组成：
| 组分 | 50T | 100T |
| AMV反转录酶(10U/μL) | 25μL | 50μL |
| 5×AMV Buffer(含DTT) | 250μL | 500μL |
| Oligo(dT)16(10μM) | 250μL | 500μL |
| RNasin(40U/μL) | 25μL | 50μL |
| dNTPs(10mM) | 200μL | 400μL |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 25μL | 50μL |
| 10×PCR Buffer | 250μL | 500μL |
| RNase-free ddH2O | 1mL | 2mL |
保存：-20℃，避免反复冻融，有效期1年。
注意事项：
- 用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
- RNA样品要避免反复多次冻融，应使RNA在冰浴中处于融化状态。
- 如果PCR效果不理想，可以适当优化条件，比如改变退火温度或增加模板量。
使用方法：
- 反转录反应
- 在冰浴的无菌无RNase的离心管中加入如下反应成分：
成分 用量 RNA模板 0.5μg Oligo(dT)16(10μM) 5μL RNase-free ddH2O 至11.5μL - 70℃保温5min后迅速在冰上冷却5min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：
成分 用量 5×AMV Buffer(含DTT) 5μL dNTPs(10mM) 2.5μL RNasin(40U/μL) 0.5μL AMV反转录酶(10U/μL) 0.5μL RNase-free ddH2O 25μL - 42℃温浴60min，如果是用随机引物，请将离心管置37℃温浴60min。
- 反应后将离心管置冰上，反应产物可用于进行后续实验或-20℃保存。
- 在冰浴的无菌无RNase的离心管中加入如下反应成分：
- PCR反应
- 按以下各组分配制50μL PCR反应体系：
成分 用量 10×PCR Buffer 5μL dNTPs(10mM) 1μL 上游引物(10μM) 1μL 下游引物(10μM) 1μL 上步RT反应所得产物 2μL Taq DNA聚合酶(5U/μL) 0.5μL ddH2O至 50μL - 混匀后短暂离心，PCR仪扩增，琼脂糖凝胶电泳观察结果。
- 按以下各组分配制50μL PCR反应体系：
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